人脐静脉血来源内皮祖细胞

人脐静脉血来源内皮祖细胞

人脐静脉血来源内皮祖细胞分离自人脐静脉血。内皮祖细胞（EPCs）是具有增殖分化潜能的成体干细胞，可定向分化为成熟的血管内皮细胞，核心功能为参与血管生成和血管损伤修复。其可从脐静脉血中动员、迁移至血管损伤部位，分化为内皮细胞，修复受损血管内皮；同时分泌多种血管活性物质和生长因子，促进新生血管形成，维持血管稳态。内皮祖细胞数量减少或功能异常与心血管疾病、糖尿病血管并发症、缺血性疾病等密切相关。人脐静脉血来源内皮祖细胞原代培养3-4天后开始贴壁，初始形态呈圆形或椭圆形；培养1-2周后逐渐增殖，形态变为短梭形或多边形；传代后可稳定维持内皮祖细胞的分化潜能和血管生成功能。该细胞是研究血管生成机制、血管损伤修复、缺血性疾病治疗及心血管药物筛选的重要实验材料，也可用于组织工程血管构建。

自备试剂：PBS缓冲液、完全培养基、Percoll分离液、免疫磁珠分选试剂、0.25%胰蛋白酶

培养基：人脐静脉血来源内皮祖细胞完全培养基（含FBS、血管内皮生长因子、干细胞因子、Penicillin、Streptomycin等）

换液频率：每2-3天换液一次

生长特性：贴壁生长

细胞形态：初始为圆形、椭圆形，增殖后为短梭形、多边形

传代比例：1:2

传代特性：可传3-5代；2-3代以内细胞分化潜能和功能最稳定

消化液：0.25%胰蛋白酶-EDTA消化液

人脐静脉血来源内皮祖细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。

方法简介：实验室采用密度梯度离心法分离脐静脉血单个核细胞，结合体外诱导培养法及免疫磁珠分选法（基于CD34、VEGFR2标志物）制备该细胞，细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。

质量检测：经内皮祖细胞特异性标志物（CD34、VEGFR2、CD133）免疫荧光鉴定，本细胞纯度可达90%以上；经体外管腔形成实验验证细胞血管生成功能正常；经检测不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等外源污染物，细胞活性达标。