人食管癌组织源成纤维细胞

人食管癌组织源成纤维细胞

人食管癌组织源成纤维细胞分离自人食管癌旁组织或癌间质组织。食管癌组织源成纤维细胞是构成食管癌微环境的关键间质细胞，具有与正常成纤维细胞不同的表型和功能特征，可分泌多种细胞因子、生长因子和细胞外基质，调控食管癌细胞的增殖、侵袭、迁移及血管生成，促进肿瘤的生长、进展和转移。其可通过重塑肿瘤间质结构，为肿瘤细胞的浸润提供通道；同时参与肿瘤免疫抑制微环境的形成，抑制机体的抗肿瘤免疫反应。该细胞保留了食管癌组织中间质细胞的典型病理特征，是人食管癌发生发展机制研究、肿瘤微环境调控机制研究及抗肿瘤药物筛选的重要实验材料。原代培养2-3天后开始贴壁，初始形态呈短梭形或不规则形；培养5-7天细胞逐渐汇合，呈长梭形，排列成旋涡状；传代后可稳定维持肿瘤相关成纤维细胞的典型形态和功能特征。

自备试剂：0.25%胰蛋白酶、胶原酶Ⅰ型、PBS缓冲液、完全培养基

培养基：人食管癌组织源成纤维细胞完全培养基（含FBS、成纤维细胞生长因子、转化生长因子β、Penicillin、Streptomycin等）

换液频率：每2-3天换液一次

生长特性：贴壁生长，增殖速度较快

细胞形态：长梭形、短梭形

传代比例：1:2-1:3

传代特性：可传5-7代；2-4代以内细胞病理功能特征最稳定

消化液：0.25%胰蛋白酶

人食管癌组织源成纤维细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。

方法简介：实验室采用胰蛋白酶-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备该细胞，细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。

质量检测：经成纤维细胞特异性标志物（波形蛋白Vimentin、α-SMA、FSP1）免疫荧光鉴定，本细胞纯度可达90%以上；经细胞因子分泌检测验证细胞功能特征；经检测不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等外源污染物，细胞活性达标。