兔肝kupffer细胞

兔肝kupffer细胞

兔肝kupffer细胞分离自兔肝脏组织，是肝脏的固有巨噬细胞，位于肝血窦内。核心功能为吞噬和清除血液中的异物、衰老红细胞、病原体及代谢废物，参与肝脏的免疫防御；分泌多种炎症因子、抗炎因子和细胞因子，调控肝脏炎症反应和免疫稳态；参与肝脏损伤后的修复与再生过程，同时在肝纤维化、肝硬化的发生发展中发挥重要调控作用。功能异常与肝炎、肝硬化、肝癌、肝纤维化等肝脏疾病密切相关。原代培养2-3天后呈半贴壁半悬浮生长，初始形态呈圆形或不规则形；传代后细胞可稳定维持kupffer细胞的典型免疫功能。是研究肝脏免疫机制、肝脏疾病发病机制及保肝药物筛选的重要实验材料。

自备试剂：胶原酶Ⅳ型、PBS缓冲液、完全培养基、Percoll分离液

培养基：兔肝kupffer细胞完全培养基（含FBS、巨噬细胞集落刺激因子、Penicillin、Streptomycin等）

换液频率：每2-3天换液一次

生长特性：半贴壁半悬浮生长

细胞形态：圆形、不规则形

传代比例：1:2

传代特性：可传3-5代；2-3代以内细胞状态最佳，功能最稳定

消化液：0.25% 胰蛋白酶 - EDTA 消化液（温和消化）

兔肝kupffer细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。

方法简介：实验室采用胶原酶灌注消化法结合密度梯度离心法及贴壁筛选法制备该细胞，通过胶原酶灌注温和分解兔肝脏组织获得单个核细胞后，经密度梯度离心分离，再利用kupffer细胞的贴壁特性进行筛选纯化，最终获得高纯度的兔肝kupffer细胞，细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。

质量检测：经kupffer细胞特异性标志物（CD68、F4/80、SR-A）免疫荧光鉴定，本细胞纯度可达90%以上；经吞噬实验及炎症因子分泌检测验证细胞功能正常；经检测不含有支原体、细菌、酵母和真菌等外源污染物，细胞活性达标。