羊肺微血管内皮细胞

羊肺微血管内皮细胞

羊肺微血管内皮细胞分离自羊肺组织内微血管，是构成羊肺微血管壁的核心功能细胞，参与肺泡-毛细血管气体交换屏障的构成。核心功能为构建肺微血管内皮屏障，维持肺泡-毛细血管间的气体交换和物质转运；分泌紧密连接相关蛋白，维持微血管壁的完整性；参与肺组织的营养供应和代谢废物清除，为肺泡上皮细胞的生长和功能维持提供微环境支持；参与肺部炎症反应的调控，调控免疫细胞向肺组织的浸润。功能异常与羊肺炎、肺纤维化、急性呼吸窘迫综合征等肺部疾病密切相关。原代培养3-4天后开始贴壁，初始形态呈多边形或铺路石样；传代后可稳定维持内皮细胞的典型形态及屏障功能。是研究羊肺气体交换生理、肺部疾病发病机制及羊用肺部药物筛选的重要实验材料。

自备试剂：0.25%胰蛋白酶、胶原酶Ⅰ型、PBS缓冲液、完全培养基、免疫磁珠分选试剂、明胶（包被培养瓶）

培养基：羊肺微血管内皮细胞完全培养基（含FBS、血管内皮生长因子、表皮生长因子、Penicillin、Streptomycin等）

换液频率：每2-3天换液一次（温和换液）

生长特性：贴壁生长，呈铺路石样紧密排列

细胞形态：多边形、铺路石样

传代比例：1:2

传代特性：可传3-5代；2-3代以内细胞屏障功能最佳，功能最稳定

消化液：0.25% 胰蛋白酶 - EDTA 消化液（温和消化）

羊肺微血管内皮细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。

方法简介：实验室采用胰蛋白酶-胶原酶联合消化法结合免疫磁珠分选法（基于CD31、vWF标志物）制备该细胞，通过特定消化体系温和分解羊肺组织，分离获得微血管片段后进一步消化为单个核细胞，经免疫磁珠分选纯化，最终获得高纯度的羊肺微血管内皮细胞，细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。

质量检测：经内皮细胞特异性标志物（CD31、vWF、紧密连接蛋白ZO-1）免疫荧光鉴定，本细胞纯度可达90%以上；经跨内皮电阻检测验证屏障功能正常；经检测不含有支原体、细菌、酵母和真菌等外源污染物，细胞活性达标。