猪肾上腺髓质细胞

猪肾上腺髓质细胞

猪肾上腺髓质细胞分离自猪肾上腺髓质组织，是肾上腺髓质的主要功能细胞，负责合成和分泌儿茶酚胺类激素。核心功能为合成和分泌肾上腺素、去甲肾上腺素等儿茶酚胺类激素，参与机体的应激反应，调控心率、血压、血糖等生理指标的稳态；对交感神经兴奋产生应答，快速释放激素以应对外界刺激；参与机体的代谢调控，促进肝糖原分解，提高血糖浓度，增强机体的能量供应。功能异常与猪应激综合征、高血压、代谢紊乱等疾病密切相关。原代培养3-4天后开始贴壁，初始形态呈圆形或多边形；传代后可稳定维持肾上腺髓质细胞的典型形态及激素分泌功能。是研究猪应激生理、内分泌调控机制及猪用抗应激药物筛选的重要实验材料。

自备试剂：0.25%胰蛋白酶、胶原酶Ⅰ型、PBS缓冲液、完全培养基、Percoll分离液、多聚赖氨酸（包被培养瓶）

培养基：猪肾上腺髓质细胞完全培养基（含FBS、胰岛素-转铁蛋白-硒补充剂、糖皮质激素、Penicillin、Streptomycin等）

换液频率：每2-3天换液一次（温和换液）

生长特性：贴壁生长，细胞间聚集性生长

细胞形态：圆形、多边形

传代比例：1:2（谨慎传代）

传代特性：可传2-4代；1-2代以内细胞激素分泌功能最佳，功能最稳定

消化液：0.25% 胰蛋白酶 - EDTA 消化液（温和消化）

猪肾上腺髓质细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。

方法简介：实验室采用胰蛋白酶-胶原酶联合消化法结合密度梯度离心法制备该细胞，通过特定消化体系温和分解猪肾上腺髓质组织，分离获得单个核细胞后，经密度梯度离心纯化，最终获得高纯度的猪肾上腺髓质细胞，细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。

质量检测：经肾上腺髓质细胞特异性标志物（嗜铬粒蛋白A CgA、酪氨酸羟化酶TH、多巴胺β-羟化酶DBH）免疫荧光鉴定，本细胞纯度可达90%以上；经儿茶酚胺类激素分泌检测验证细胞功能正常；经检测不含有支原体、细菌、酵母和真菌等外源污染物，细胞活性达标。