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SUMO2 ELISA试剂盒主要用于体外定量检测人血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清等样本中的SUMO2蛋白含量。其核心作用是通过酶联免疫吸附实验(ELISA)技术,利用双抗体夹心法原理,实现对SUMO2蛋白的高灵敏度、高特异性检测。
一、检测原理
试剂盒采用双抗体夹心法:用纯化的SUMO2抗体包被微孔板,制成固相抗体;往包被单抗的微孔中依次加入样本和HRP标记的SUMO2抗体,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物;经过洗涤后加底物TMB显色,TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,最终在酸的作用下转化成黄色。颜色的深浅和样品中SUMO2的含量呈正相关。
二、检测范围与灵敏度
检测范围:0.312-20ng/mL。
灵敏度:高灵敏度,适用于多种样本类型。
三、样本类型
适用样本:血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等。
四、实验注意事项
洗涤:不充分的洗涤会导致差异和高背景,必要时可增加洗涤液中的盐浓度或洗涤次数。
封闭:封闭液的作用是降低非特异性结合,若背景过高,可尝试使用更高浓度的封闭液或延长封闭时间。
抗体浓度:试剂稍有不同,可能需要优化抗体的量。
五、试剂盒选择
规格:48T/盒、96T/盒。
品牌:国产。
货期:现货。
有效期:6个月。
六、实验步骤
样本处理:血清需室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
加样与孵育:标准品和样本加样后,加入酶连接物和抗体溶液,室温孵育1小时。
洗板与显色:倒出液体后洗板,加入TMB显色液,避光反应15分钟。
读数:加终止液后,450nm处读OD值。
七、结果计算
OD值处理:建议减除空白孔值(若空白孔OD低于0.1可直接计算)。
标准曲线:以标准品浓度为横坐标,OD值为纵坐标绘制曲线,根据样品OD值计算含量。
八、注意事项
样本处理:样本和标准品需做双孔平行实验。
显色后读数:显色后5分钟内读数。
储存:未开封的试剂盒所有试剂均按试剂瓶标签上所示保存。
一、检测原理
试剂盒采用双抗体夹心法:用纯化的SUMO2抗体包被微孔板,制成固相抗体;往包被单抗的微孔中依次加入样本和HRP标记的SUMO2抗体,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物;经过洗涤后加底物TMB显色,TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,最终在酸的作用下转化成黄色。颜色的深浅和样品中SUMO2的含量呈正相关。
二、检测范围与灵敏度
检测范围:0.312-20ng/mL。
灵敏度:高灵敏度,适用于多种样本类型。
三、样本类型
适用样本:血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等。
四、实验注意事项
洗涤:不充分的洗涤会导致差异和高背景,必要时可增加洗涤液中的盐浓度或洗涤次数。
封闭:封闭液的作用是降低非特异性结合,若背景过高,可尝试使用更高浓度的封闭液或延长封闭时间。
抗体浓度:试剂稍有不同,可能需要优化抗体的量。
五、试剂盒选择
规格:48T/盒、96T/盒。
品牌:国产。
货期:现货。
有效期:6个月。
六、实验步骤
样本处理:血清需室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
加样与孵育:标准品和样本加样后,加入酶连接物和抗体溶液,室温孵育1小时。
洗板与显色:倒出液体后洗板,加入TMB显色液,避光反应15分钟。
读数:加终止液后,450nm处读OD值。
七、结果计算
OD值处理:建议减除空白孔值(若空白孔OD低于0.1可直接计算)。
标准曲线:以标准品浓度为横坐标,OD值为纵坐标绘制曲线,根据样品OD值计算含量。
八、注意事项
样本处理:样本和标准品需做双孔平行实验。
显色后读数:显色后5分钟内读数。
储存:未开封的试剂盒所有试剂均按试剂瓶标签上所示保存。
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