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除了基础条件,其他外界因素也容易引起细胞的“小脾气”,比如运输路上的颠簸、传代方法等等。针对几种常见的问题,来一 一为大家解答。
这是因为RAW 264.7 细胞贴壁较松,快递运输路上受到颠簸,可能会脱落。脱落的细胞悬浮在培养基中不容易聚焦。
这时候不用担心,把细胞放进培养箱静置两个小时就可以看到了。
如果静置后看到的细胞仍偏少,请将瓶子里的培养基都转移到离心管里,1200rpm(约250g)离心3分钟,即可看到沉淀的细胞。
细胞全部脱落,慌乱之下可能会一个细胞都找不着。这个时候离心验证是最好的方法。
问题2 :收货处理后,细胞不贴壁
将细胞离心收集,用新鲜的培养基重悬细胞放到新的培养瓶里之后,可能会出现细胞成团漂浮、不贴壁的情况。
这种情况下,把细胞离心收集,用1mL培养基重悬,慢慢地,轻轻地吹打,直到细胞被吹成单细胞,就可以重新铺板了。
RAW 264.7脱落后倾向于抱团,抱团时细胞是活着的,但很难贴壁。记得一定要把聚成团的细胞吹散成单细胞,不然细胞很难重新贴壁。
养好RAW 264.7(小鼠单核巨噬细胞白血病细胞)之进阶篇2
正确的传代方法是养好RAW 264.7的关键,每一步操作都要细致入微,稍有不慎细胞就分化了。
RAW 264.7不能用胰酶消化,许多实验室用细胞刮传代,这是一种非常经典好用的方法。
在养RAW 264.7细胞这十几年里,摸索出一个更不错的方法:吹打传代。
吹打传代操作简单,对养细胞的萌新们更友好,也能更好地控制细胞分化率。
养好RAW 264.7(小鼠单核巨噬细胞白血病细胞)之进阶篇1
问题1 :收货后,细胞不见了
总是会收到这类反馈:收到细胞,期待值满满地打开包装,但在显微镜下却找不到细胞!这是因为RAW 264.7 细胞贴壁较松,快递运输路上受到颠簸,可能会脱落。脱落的细胞悬浮在培养基中不容易聚焦。
这时候不用担心,把细胞放进培养箱静置两个小时就可以看到了。
如果静置后看到的细胞仍偏少,请将瓶子里的培养基都转移到离心管里,1200rpm(约250g)离心3分钟,即可看到沉淀的细胞。
细胞全部脱落,慌乱之下可能会一个细胞都找不着。这个时候离心验证是最好的方法。
问题2 :收货处理后,细胞不贴壁
将细胞离心收集,用新鲜的培养基重悬细胞放到新的培养瓶里之后,可能会出现细胞成团漂浮、不贴壁的情况。
这种情况下,把细胞离心收集,用1mL培养基重悬,慢慢地,轻轻地吹打,直到细胞被吹成单细胞,就可以重新铺板了。
RAW 264.7脱落后倾向于抱团,抱团时细胞是活着的,但很难贴壁。记得一定要把聚成团的细胞吹散成单细胞,不然细胞很难重新贴壁。
养好RAW 264.7(小鼠单核巨噬细胞白血病细胞)之进阶篇2
正确的传代方法是养好RAW 264.7的关键,每一步操作都要细致入微,稍有不慎细胞就分化了。
RAW 264.7不能用胰酶消化,许多实验室用细胞刮传代,这是一种非常经典好用的方法。
在养RAW 264.7细胞这十几年里,摸索出一个更不错的方法:吹打传代。
吹打传代操作简单,对养细胞的萌新们更友好,也能更好地控制细胞分化率。