试剂盒的重复性验证怎么做

    在完成试剂盒的重复性验证时，关键在于实验设计的严谨性和数据分析的准确性。以下是试剂盒重复性验证的标准化操作流程及关键指标，结合行业规范与实验方法学要求：

以下是试剂盒重复性验证的标准化操作流程及关键指标，结合行业规范与实验方法学要求：

‌一、重复性验证的核心指标‌
‌变异系数（CV）‌

‌板内重复性‌：同一批次试剂盒对同一样本重复检测≥20次，CV应＜10%‌。
‌板间重复性‌：不同批次试剂盒检测同一样本≥6次，CV应＜15%‌。
‌组内相关系数（ICC）‌

用于评估观察者内/间一致性，理想值≥0.90‌。
‌二、实验操作步骤‌
‌样本选择与处理‌

使用已知浓度的标准品或临床样本（如血清、细胞培养上清），避免溶血或脂血干扰‌。
‌检测流程‌

按说明书规范操作，包括加样量、孵育时间、洗涤次数等‌。
每组样本设置3复孔，确保操作条件一致‌。
‌数据分析‌

计算均值、标准差及CV值，绘制Bland-Altman图评估一致性‌。
‌三、常见问题与优化‌
‌CV超标‌：检查加样精度、孵育温度或试剂稳定性‌。
‌批次差异‌：验证不同批次试剂盒的校准曲线一致性‌。
‌四、扩展验证方法‌
‌多中心验证‌：在≥3家实验室进行盲法测试，确保结果可重复性‌。

‌干扰测试‌：评估样本中常见干扰物（如胆红素、血红蛋白）对重复性的影响‌。

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