人小脑颗粒细胞

人小脑颗粒细胞

人小脑颗粒细胞分离自人小脑组织。小脑颗粒细胞是小脑皮层中数量最多的神经元，作为小脑信息处理的核心功能细胞，具有接收并整合前庭、脊髓及大脑皮层传入信号的功能，参与机体的平衡调节、运动协调及运动学习记忆过程。该细胞可分泌谷氨酸等兴奋性神经递质，通过突触连接形成复杂的神经网络，调控小脑的正常生理功能；其功能异常或损伤与小脑萎缩、共济失调、帕金森病、小脑性脑瘫等神经系统疾病密切相关。人小脑颗粒细胞原代培养3-4天后开始贴壁，初始形态呈圆形，随后逐渐伸展形成短小突起；培养1周左右细胞成熟，突起相互连接形成神经网络；传代后可稳定维持神经元的典型形态学特征和神经递质分泌功能。该细胞是研究小脑生理功能调控、神经系统疾病发病机制及神经保护药物筛选的重要实验材料。

自备试剂：0.25%胰蛋白酶-EDTA消化液、PBS缓冲液、神经元专用完全培养基、多聚赖氨酸（包被培养瓶）
培养基：人小脑颗粒细胞完全培养基（含FBS、神经生长因子、脑源性神经营养因子、Penicillin、Streptomycin等）
换液频率：每3-4天换液一次（温和换液，避免机械损伤）
生长特性：贴壁生长，依赖包被基质，可形成神经网络
细胞形态：圆形胞体，带有多个细长神经突起
传代比例：1:2（谨慎传代，减少细胞损伤）
传代特性：可传2-3代；1-2代以内细胞功能最佳，状态最稳定
消化液：0.25%胰蛋白酶-EDTA消化液（低温温和消化）
人小脑颗粒细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。

方法简介：实验室采用胰蛋白酶-EDTA联合消化法结合密度梯度离心法及神经细胞纯化法制备该细胞，细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。

质量检测：经神经元特异性标志物（NeuN、β-Ⅲ微管蛋白、MAP2）免疫荧光鉴定，本细胞纯度可达90%以上；经神经递质分泌检测验证细胞功能正常；经检测不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等外源污染物，细胞活性达标。