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可以通过植物25羟基维生素D3 ELISA试剂盒结合检测结果进行定性判断,判断逻辑基于ELISA检测的显色反应与标准曲线对比实现,具体方法如下:
一、试剂盒检测判断流程
完成完整检测操作:按照操作流程对样本进行前处理、加样、温育、洗涤、显色、终止,最终用酶标仪读取样本的吸光度(OD值)。
对照结果判定:
阴性判定(不含有):若样本OD值<试剂盒检测下限(常规为60ng/L对应的OD值),且样本显色未发生明显变色(仍接近空白孔底色),即可判定样本中不含有可检测到的25羟基维生素D3,或含量低于试剂盒的检测灵敏度。
阳性判定(含有):若样本OD值落在试剂盒标准曲线范围内(常规60ng/L-2500ng/L),且出现明显显色(最终呈黄色,颜色深浅与含量正相关),即可判定样本中含有25羟基维生素D3,还可通过标准曲线计算出具体浓度。
样本浓度过高情况:若样本OD值大于最高浓度标准品的OD值,说明样本中25羟基维生素D3含量超过检测范围,需要对样本稀释后重新检测,仍显阳性则确认含有高浓度目标物。
二、补充验证说明
ELISA检测为免疫结合法,若需要进一步确认结果,可搭配LC-MS(液相色谱-质谱联用)方法验证,已有研究显示:经紫外线UVB处理的番茄、辣椒叶片中可检出25羟基维生素D3,而未处理样本通常低于检测下限。
一、试剂盒检测判断流程
完成完整检测操作:按照操作流程对样本进行前处理、加样、温育、洗涤、显色、终止,最终用酶标仪读取样本的吸光度(OD值)。
对照结果判定:
阴性判定(不含有):若样本OD值<试剂盒检测下限(常规为60ng/L对应的OD值),且样本显色未发生明显变色(仍接近空白孔底色),即可判定样本中不含有可检测到的25羟基维生素D3,或含量低于试剂盒的检测灵敏度。
阳性判定(含有):若样本OD值落在试剂盒标准曲线范围内(常规60ng/L-2500ng/L),且出现明显显色(最终呈黄色,颜色深浅与含量正相关),即可判定样本中含有25羟基维生素D3,还可通过标准曲线计算出具体浓度。
样本浓度过高情况:若样本OD值大于最高浓度标准品的OD值,说明样本中25羟基维生素D3含量超过检测范围,需要对样本稀释后重新检测,仍显阳性则确认含有高浓度目标物。
二、补充验证说明
ELISA检测为免疫结合法,若需要进一步确认结果,可搭配LC-MS(液相色谱-质谱联用)方法验证,已有研究显示:经紫外线UVB处理的番茄、辣椒叶片中可检出25羟基维生素D3,而未处理样本通常低于检测下限。
