做ELISA实验收集血浆样本时为什么要加抗凝剂？

做ELISA实验收集血浆样本时为什么要加抗凝剂？顾名思义，抗凝剂就是为了防止血液凝固的。加了抗凝剂后，血液在一定的时间内会保持原来的物理化学状态。如果没加抗凝剂，血浆是凝聚在一起的，不好测定。常见的抗凝剂有哪些呢？今天就为您详细总结如下：

‌常见的血浆抗凝剂主要包括肝素、EDTA、柠檬酸钠和草酸盐等，它们各有特点，适用于不同的实验需求。

‌肝素是最常用的抗凝剂之一，通过与抗凝血酶Ⅲ结合，抑制凝血酶的活性，从而阻止纤维蛋白原转化为纤维蛋白。肝素抗凝的血浆适用于大多数生化检测和部分免疫学实验，但高浓度的肝素可能干扰PCR和某些ELISA实验，需谨慎使用。

EDTA（乙二胺四乙酸）通过螯合钙离子阻断凝血级联反应，能有效防止血液凝固。EDTA抗凝的血浆适用于血液学检测，如血细胞计数，但由于其可能影响某些金属离子依赖性酶活性，一般不推荐用于钙、镁等离子的测定。

柠檬酸钠通过与钙离子结合发挥抗凝作用，常用于凝血功能检测（如PT、APTT）。其抗凝效果稳定，且对ELISA实验干扰较小，因此是许多免疫学研究的首选抗凝剂。

草酸盐（如草酸钾、草酸钠）也能通过结合钙离子抗凝，但可能改变血浆pH值或干扰某些代谢物测定，因此应用范围较窄。

选择抗凝剂时，需结合实验目的和检测指标，避免因抗凝剂干扰导致假阳性或假阴性结果。例如，ELISA检测细胞因子时，肝素或柠檬酸钠抗凝血浆更为合适，而EDTA可能影响某些抗原-抗体结合。此外，抗凝剂与血液的比例也需严格把控，以确保样本质量。

总之，合适的抗凝剂不仅能保证血浆样本的稳定性，还能提高实验数据的可靠性，是实验成功的关键因素之一。

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