技术文献
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细胞全能性原理:植物细胞具有发育成完整个体的潜能,这是技术实施的理论核心。离体后的细胞在特定条件下可脱分化为愈伤组织,进而再分化形成完整植株植物细胞组织培养的关键技术原理。
植物细胞组织培养的关键技术原理
一、理论基础
细胞全能性
植物细胞含有全套遗传信息,在离体条件下通过脱分化形成愈伤组织,再经再分化形成完整植株。这一特性是组织培养的理论基础,其表达难易程度为:受精卵>生殖细胞>干细胞>体细胞。
代谢调控机制
通过激素(如生长素和细胞分裂素)调控细胞分裂与分化,例如生长素/细胞分裂素比例决定愈伤组织形成或器官发生。
二、关键技术流程
外植体选择与消毒
选取健康组织(如茎尖、叶片)作为外植体,经酒精、次氯酸钠等消毒处理以去除微生物污染。
培养基配制
需包含无机盐、碳源、维生素及植物激素,pH值通常调节至5.6-5.8。MS培养基是常用基础配方。
培养条件控制
温度:多数植物适宜25±2℃。
光照:再分化阶段需光照(12-16小时/天),脱分化阶段可暗培养。
湿度:维持90%以上相对湿度。
脱分化与再分化
脱分化:外植体在激素诱导下形成无定形愈伤组织。
再分化:调整激素比例诱导愈伤组织形成胚状体或器官原基。